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紫外可見分光光度計(jì)測(cè)得門冬酰胺酶活力含量過程方法 

酶活力對(duì)照品溶液的制備取經(jīng)105T：

干燥至恒重的硫酸銨適量，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制

成0. 0015mol/L的溶液。

供試品溶液的制備取本品約O . lg ,精密稱定，加磷酸

鹽緩沖液（取0. lm o l/L磷酸氫二鈉溶液適量，用0. lmol/L

磷酸二氫鈉溶液調(diào)節(jié)p H 值至8.0)溶解并定量稀釋制成每

lm l中約含5 單位的溶液。

測(cè)定法取試管3 支（14Cm X l . 2cm),各加人用上述磷

酸鹽緩沖液配制的0. 33%門冬酰胺溶液1.9ml,于371C水浴

中預(yù)熱3分鐘，分別于*管U ) 中加人25% 三氯醋酸溶液

0. 5ml，第2、3 管⑴中各精密加人供試品溶液0. lm l ,置37T

水浴中，準(zhǔn)確反應(yīng)15分鐘，立即于*管U )中精密加入供試

品溶液0.1m l,第2、3 管（《) 中各加人25% 三氣醋酸溶液

0.5ml,搖勻，分別作為空白反應(yīng)液（t。）和反應(yīng)液（i )。精密量

取h 、t 和對(duì)照品溶液各0. 5ml,置試管中，各加水7. 0ml與碘

化汞鉀溶液(取碘化gong23g、碘化鉀16g,加水至100ml,臨用前

與20%氫氧化鈉溶液等體積混合）1. 0ml,混勻，另取試管一

支，加水7. 5ml與碘化gong鉀溶液1. 0ml作為空白對(duì)照管，室溫

放置15分鐘，照紫外可見分光光度計(jì)法（通則0401)，在450nra

的波長處分別測(cè)定fo吸光度A。、t 吸光度A ,和對(duì)照品溶液吸

光度As,以A ,的平均值，按下式計(jì)算：

效價(jià)（單雙形「（早位僅//mmgg)) = (戌 —AAS°X)X稱5樣X量?。ㄡ?/span>mg倍) 紀(jì) ^

式中5 為反應(yīng)常數(shù)；

F 為對(duì)照品溶液濃度的校正值。

效價(jià)單位定義：在上述條件下，一個(gè)門冬酰胺酶單位相當(dāng)

于每分鐘分解門冬酰胺產(chǎn)生Ipmol氨所需的酶量。

蛋白質(zhì)含量取本品約20mg，精密稱定，照蛋白質(zhì)含量

測(cè)定法（通則0731*法）測(cè)定，即得。

比活由測(cè)得的效價(jià)和蛋白質(zhì)含量計(jì)算每lm g蛋白中

含門冬酰胺酶活力的單位數(shù)。